蜂蜜中6種青霉素殘留量的測(cè)定——分析條件的選擇

時(shí)間：2023-03-25 06:32:49來(lái)源：food欄目：食品快速檢測(cè) 閱讀：

蜂蜜中6種青霉素殘留量的測(cè)定——分析條件的選擇

[db:作者] / 2022-12-09 00:00

5.2.4.7分析條件的選擇

(1)凈化樣品固相萃取柱的選擇

在本方法的研究中，用Oasis HLB固相萃取柱、BUND ELUT C18固相萃取柱、ENVI-18 固相萃取柱、Octadecyl C18固相萃取柱、LiChrolut EN固相萃取柱和Sep-Pak C18固相萃取柱共六種固相萃取柱對(duì)6種青霉素的提取效率和凈化效果進(jìn)行了比較。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，Sep-Pak C18固相萃取柱回收率低(只有50%～60%)，且凈化效果也不理想，這是該固相萃取柱填料中含碳量小于14%所致。BUND ELUT C18固相萃取柱、ENVI-18 固相萃取柱、LiChrolut EN固相萃取柱和Octadecyl C18固相萃取柱的回收率均好，但樣品溶液過(guò)柱速度較慢，樣品預(yù)處理時(shí)間長(zhǎng)，還存在著不同批次之間回收率的顯著差異。而使用Oasis HLB固相萃取柱凈化樣品回收率較好，凈化效果也令人滿意，特別適用于本方法。因此本方法選擇OasisHLB固相萃取柱凈化樣品。

(2)提取溶液的選擇

分別用去離子水、4%氯化鈉溶液和0.1 mol/L磷酸二氫鈉緩沖溶液(pH 9.0)作為提取液，完成蜂蜜樣品中6種青霉素回收率實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，三種提取液的回收率均在78.5%～102.0%范圍，回收率數(shù)據(jù)見(jiàn)表5-29。用去離子水作為提取液對(duì)蜂蜜樣品進(jìn)行測(cè)定，獲得了較好凈化效果。用三種提取液制備的蜂蜜基質(zhì)混合標(biāo)準(zhǔn)溶液測(cè)定后，獲得的6種青霉素靈敏度無(wú)顯著差異，同時(shí)用去離子水作為提取液還避免了樣液中殘存的鹽對(duì)檢測(cè)儀器造成的不良影響。因此，本方法選擇去離子水作為蜂蜜中6種青霉素的提取液。

表5-29 三種提取液對(duì)回收率(%)的影響

(3)OasisHLB 固相萃取柱洗脫劑和用量的選擇

本方法比較了用乙腈和甲醇作為OasisHLB 固相萃取柱的洗脫劑,對(duì)6種青霉素回收率產(chǎn)生的影響。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，用乙腈作洗脫劑，用量在3mL以內(nèi)，6種青霉素均能從OasisHLB 柱上完全洗脫下來(lái)。但重復(fù)性不如甲醇好，因此，本方法選用甲醇作為OasisHLB柱的洗脫劑。

分別用0.5～5mL甲醇對(duì)6種青霉素完成洗脫條件實(shí)驗(yàn)，結(jié)果見(jiàn)表5-30。從表5-30可以看出：OasisHLB固相萃取柱用3mL甲醇洗脫6種青霉素的回收率均在90%以上，因此，本方法選用3mL甲醇作為OasisHLB柱的洗脫劑用量。

表5-30 OasisHLB固相萃取柱洗脫劑用量對(duì)回收率(%)的影響

(4)液相色譜分析柱的選擇

分別對(duì)μBondapak C18 300mm×4.0mm色譜柱和SunFire TM 3.5um C18 150mm×2.1mm色譜柱進(jìn)行了比較。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，這兩種色譜柱的靈敏度均能滿足要求，但μBondapak C18 300mm×4.0mm色譜柱對(duì)鄰氯青霉素和乙氧萘青霉素分離度不如SunFire TM 3.5μm C18 150mm×2.1mm色譜柱好，μBondapak C18柱流速在1.5mL/min，進(jìn)質(zhì)譜儀之前必須分流，而分流時(shí)對(duì)6種青霉素結(jié)果的測(cè)定產(chǎn)生一定誤差，而使用SunFire TM 3.5um C18柱不需分流，定量準(zhǔn)確度優(yōu)于μBondapak C18柱，通過(guò)以上對(duì)兩種色譜柱的比較，本方法選用SunFireM 3.5um C18 150mm×2.1mm為6種青霉素的分析柱。

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